外囊泡的来源广泛，细菌外囊泡（BEV）同样也会影响各种细胞行为，包括遗传信息的传输、噬菌体感染、代谢介导以及细菌-细菌和细菌-宿主之间的相互作用。为了方便大家更全面的认识BEV在生物治疗开发中的研究现状，我们希望通过这篇综述来系统地向大家进行介绍。

PART/01  作为基因治疗的递送载体

A. 靶向骨的BEVs-hCXCR4-SOST iRNA（BEV-CSs）治疗骨质疏松症的示意图。

B. siRNA@M-/PTX-CA-OMV调节巨噬细胞代谢和抑制肿瘤转移的示意图。

C. OMVtRNA - pre-miR-126 对抗乳腺癌的示意图。

D.BEV递送的DNA质粒作为疫苗的示意图。

E. BEV递送了CRISPR-Cas 9，用于树突状细胞靶向基因编辑。

PART/ 02  用于递送治疗性分子

A. OMV@PGZ 搭载在中性粒细胞的便车上进入大脑后，用于增强缺血性中风治疗效果的示意图。

B. BEV 递送化疗药物阿霉素用于癌症治疗的示意图。

C. BEV负载左氧氟沙星对抗抗生素耐药细菌的示意图。

D. 加载利福平的介孔二氧化硅颗粒，被革兰氏阴性大肠杆菌的BEV包被，以克服革兰氏阴性菌原本的耐药性。

E. BEV 递送的过氧化氢酶缓解肿瘤缺氧并增强放疗效果的示意图。

PART/ 03  用于递送联合治疗的功能性制剂

A. 融合黑色素瘤细胞膜囊泡（CMV）和沙门氏菌衍生的外膜囊泡（OMV）的外囊泡封装 PLGA - 吲哚菁绿（PI@EPV）以增强协同抗肿瘤作用的示意图。

B. OMV 包被的聚多巴胺纳米颗粒（MOD@DMV）增强抗瘤光热免疫治疗的构建路线方案。

C. MOD@DMV形态的TEM图像和光热性能的表征。

D.靶向仿生递送平台（ZnBq/Ce6@ZIF-8@OMV）的图示，大肠杆菌的 OMV在基因改造后，靶向对鲍曼不动杆菌的特异性识别，用于运输金属抗生素对抗多重耐药细菌。

E. ZnBq / Ce6@ZIF-8@OMV在体内发挥抗菌作用，消除脑组织中的细菌并促进感染小鼠的存活。

F. 生物矿化大肠杆菌衍生的外膜囊泡，以减轻过度反应的炎症反应和肝损伤，包裹溶瘤腺病毒以介导肿瘤细胞自噬，用于系统免疫治疗。

PART/ 04 作为纳米疫苗

01/ 抗细菌感染疫苗

A. 含有 SaoA-LPP的BEV纳米疫苗可保护小鼠免受猪链球菌感染。 

B. 富含T3SS-3和T6SS-1（M9-OMV）的基于BEV的疫苗可保护小鼠免受毒性性类鼻疽芽孢杆菌的侵害，且对活细胞没有毒性。

C. ΔompAΔompCΔompD BEV纳米广谱疫苗保护小鼠免受所有沙门氏菌菌株和APEC O78的侵害。

D. 杂交纳米疫苗（Ab-NP）表现出高度的尺寸均匀性和更强的免疫反应。

E. BEV与肺泡巨噬细胞膜杂交以提高生物相容性和调节免疫反应，降低免疫过度刺激、过度炎症或对宿主组织造成损伤。

02/ 抗病毒感染疫苗

A. 将外露SARS-CoV-2刺突蛋白的细胞膜囊泡与鼠伤寒沙门氏菌的BEV杂交，形成病毒模拟杂交膜衍生囊泡（HMV），BEV作为佐剂来增强免疫反应。 

B. 在BEV上改进LPS可保护小鼠免受不同血清型的流感病毒感染。 

C. 将HIV-1包膜近端外部区域（MPER）与外膜蛋白OmpF掺入BEV纳米疫苗上可诱导抗HIV 1-抗体的产生。

D. 基于BEV的疫苗诱导针对 8 种血清型HPV的L2特异性IgG滴度。

E. 负载HPV E7的BEV疫苗表现出抗肿瘤功效，表明该疫苗对HPV阳性或宫颈癌患者具有潜在的治疗价值。 

F. 表达融合HCV蛋白的BEV纳米疫苗在小鼠中诱导IgG-1，表明BEV具有卓越佐剂特性及其作为未来HCV疫苗开发平台的潜力。

03/ 抗肿瘤疫苗

A. 基于OMV的疫苗示意图: 通过在ClyA上融合多种蛋白质捕获器 （Spycatcher 和 Snoopcatcher）进行多功能抗原展示，实验表明其在 MC38肿瘤模型中具有潜在的抗肿瘤免疫力。

B. 基于OMV的mRNA递送系统方案：通过在OMV表面融合RNA结合蛋白 L7Ae和内体逃逸促进蛋白LLO 。

C. 基于OMV的mRNA递送系统的转移抑制效果，对体内的抗肿瘤疗效和长期免疫记忆的影响。

D. 通过膜融合嗜粘蛋白阿克曼菌的外膜囊泡和肿瘤衍生外泌体制备 Lipo@HEV的示意图，辅以表达PD-L1的质粒，用于协同癌症免疫治疗。

E.制备和生物矿化OMV疫苗（OMV-SIRPα@CaP/GM-CSF）以增强血液中的安全循环，刺激训练免疫力以进行不同的肿瘤消退。

BEV的优势

1.与哺乳动物细胞来源的细胞外囊泡（MEV）相比，BEV具有一些显著的特点：

更易生产、产量更高，且成本更低。作为细菌的衍生物，其倍增时间短，可以进行高密度的液体培养，只需依赖于廉价且容易获得的液体培养基，从而降低了成本益。

2. 高度稳定，并且对蛋白酶和核酸酶等多种酶活性具有抵抗力这一特性，适合用于对温度和酶活性敏感的生物分子货物，同时允许在高温下长期储存生物分子。而无需长时间昂贵的物流过程（如冷冻储存）。

3. 穿透能力更强，能够穿透生物组织屏障，如上皮细胞层，靶向骨骼结构，甚至绕过血脑屏障（BBB），同时BEVs具有MEV不具备的对亲本细菌的亲和力。

贝克曼库尔特生命科学细菌外囊泡纯化方案

参考文献：

1. Bacteria extracellular vesicle as nanopharmaceuticals for versatile biomedical potential2.Bacterial extracellular vesicles as bioactive nanocarriers for drug delivery: Advances and perspectives