编号：YYHY00407
篇名：CD147单抗介导的基因治疗纳米颗粒的肺癌细胞靶向性研究
作者：吴飞龙[1] ;孔庆磊[1] ;蔡松旺[2] ;叶志强[1]
关键词：CD147 纳米载体 基因治疗 蛋白激酶Cε
机构： [1]中山大学附属第三医院急诊科,广东广州510630; [2]中山大学附属第三医院心胸外科,广东广州510630
摘要： 目的：本研究采用靶向CD147的单克隆抗体对纳米基因载体颗粒进行靶向修饰后,进行针对肺癌细胞的蛋白激酶Cε（protein kinase Cε,PKCε）小干扰RNA基因治疗,观察其对肺癌细胞增殖和迁移能力的抑制效果。方法：制作可靶向CD147蛋白的磁性纳米基因载体。激光扫描共聚焦显微镜观察肺癌细胞CD147表达量。分别设立CP组、CN组和LP组复合物,按每6孔板孔质粒总量250 ng进行细胞转染。另设CD147靶向载体对照CA组和未转染细胞的对照（control）组。激光扫描共聚焦显微镜观察纳米造影剂的细胞内吞效果。实时荧光定量PCR检测PKCε的mRNA表达。Western blot法检测PKCε、Ki67、MMP3、Wnt1和GAPDH的蛋白表达。平板克隆形成实验检测细胞的增殖能力。Transwell法检测细胞的迁移能力。结果：免疫荧光法染色观察证实,人肺癌A549细胞的胞膜高表达CD147蛋白。CP组细胞中siRNA高效进入A549细胞,质粒内吞效率大于CN组和LP组。CP组、CN组、LP组和CA组的A549细胞中PKCε的mRNA相对表达量分别为control组的（9.76±0.18）%、（98.51±0.32）%、（99.17±0.16）%和（99.68±0.11）%,CP组与control组间的差异有统计学显著性（P〈0.05）,CN组、LP组与control组间的差异无统计学显著性。CP组PKCε、Ki-67、MMP3及Wnt1蛋白的表达量明显降低,CN组和LP组与对照组之间的蛋白表达量的差异无统计学显著性。CP组的克隆形成数量明显少于control组,差异具有统计学显著性（P〈0.05）。CN组、LP组和CA组的有效克隆数量与control组相比差异没有统计学显著性。CP组的过膜细胞数量明显少于control组,差异具有统计学显著性（P〈0.05）。CN组、LP组和CA组的数量与control组相比差异没有统计学显著性。结论：靶向CD147修饰的纳米基因载体,可以对肺癌细胞进行高效的PKCε-siRNA基因治疗,实现对肺癌细胞增殖和迁移能力的高效抑制。
