编号：YYHY00698
篇名：PAMAM/sh-miR-34a纳米复合物对黑素瘤细胞的抑制作用
作者：李佳飞[1] ;张紫杰[1] ;陈秀慧[1] ;籍涛[2] ;王彦宗[2]
关键词： 纳米复合物 聚酰胺-胺 MIR-34A 黑素瘤
机构： [1]河北北方学院,张家口075000; [2]北京军区卫生干部训练中心,北京102300
摘要： 目的将树枝状聚合物聚酰胺-胺（PAMAM）包载可以表达具有抑制人恶性黑素瘤细胞A375增殖、侵袭和转移的miR-34a的质粒sh-miR-34a,构建聚阳离子纳米复合物PAMAM/sh-miR-34a。考察形成的复合物的粒径、zeta电位、细胞摄取,以及对A375细胞的抑制作用。方法利用粒度测定仪测定纳米复合物的粒径和电位,凝胶电泳实验测定PAMAM对sh-miR-34a的包裹能力;利用罗丹明标记的sh-miR-34a考察A375细胞对纳米复合物的摄取;CCK8法测定PAMAM/shmiR-34a对A375细胞的抑制作用;Transwell法测定PAMAM/sh-miR-34a抑制A375细胞迁移和侵袭作用;蛋白质印迹法测定PAMAM/sh-miR-34a对A375细胞中pAkt、pRb、pERK1/2蛋白表达的阻滞作用。结果 PAMAM包裹sh-miR-34a可形成稳定的纳米复合物,在N/P=20时,细胞对PAMAM/sh-miR-34a的摄取达最高（P〈0.05）。PAMAM可以有效携带shmiR-34a进入A375细胞,体外抑制A375细胞的增殖、侵袭和迁移,并且可以阻滞A375细胞中pAkt、pRb和pERK1/2蛋白的表达。结论 PAMAM可以包裹sh-miR-34a并对人恶性黑素瘤A375细胞起到抑制作用。
