编号:CPJS06830
篇名:氧化石墨烯基质毛细管电色谱胰蛋白酶微反应器的性能研究
作者:刘佳 董旭 郭华 王嫚 申刚义
关键词: 酶微反应器 氧化石墨烯 毛细管电色谱 胰蛋白酶 抑制剂
机构: 中央民族大学药学院
摘要: 基于石墨烯优良的物化性能,利用层层组装法将氧化石墨烯修饰于石英毛细管内壁,制备了氧化石墨烯基质的毛细管电色谱,通过电渗流、拉曼光谱等对其进行表征。在此基础上,基于离子键合法将胰蛋白酶固定于毛细管电色谱柱头,制备胰蛋白酶微反应器。两者结合构成毛细管电色谱胰蛋白酶微反应器。实验结果显示,氧化石墨烯作为基质既可提高样品的分离效率,还能促进胰蛋白酶的催化性能。氧化石墨烯修饰的毛细管电色谱对N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐(BAEE)和N-苯甲酰-L-精氨酸(BA)混合物的分离度从裸毛细管的3.70提升至4.71,而其固定化酶活性(米氏常数Km=1.10mmol/L,最大反应速率Vmax=0.32mmol·L^-1·s^-1)也明显优于裸毛细管(Km=109.77mmol/L,Vmax=0.00046mmol·L^-1·s^-1)。利用所制备的微反应器从10种中药材中筛选胰蛋白酶抑制剂活性成分的药材,结果发现三七和大黄中均存在胰蛋白酶抑制剂活性成分。