编号:NMJS09067
篇名:基于高通量测序技术的9种铁线莲属药材混合粉末分子鉴定
作者:呼和 莫日根 乌雅汉 乌日汗 额尔敦呼 白明君 包桂花 许亮
关键词: 高通量测序技术 ITS2 铁线莲属 药材 混合粉末 分子鉴定
机构: 内蒙古民族大学 新巴尔虎右旗阿拉坦额莫勒镇社区卫生服务中心 内蒙古自治区国际蒙医医院 蒙医药研发工程教育部重点实验室 辽宁中医药大学
摘要: 目的建立基于高通量测序技术的9种铁线莲属混合粉末分子鉴定方法。方法采用高通量测序技术,对9种铁线莲属药材混合粉末样品中的总DNA经提取,对ITS2片段进行PCR扩增,利用Illumina MiSeq平台对DNA片段进行双端测序,最后采用FLASH、QIIME、GraPhlAn及MEGA 7.0软件对序列进行整理并聚类分析,鉴定混合粉末中的物种。结果混合粉末样品中得到高质量的ITS2序列共496条,铁线莲属物种含有序列72条,比对出棉团铁线莲、女萎铁线莲、短尾铁线莲、灌木铁线莲、单叶铁线莲、黄花铁线莲、粗齿铁线莲等7个物种,未能比对出东北铁线莲和芹叶铁线莲。结论以ITS2作为DNA条形码,采用高通量测序技术,可以鉴定出铁线莲属药材混合样品中的7个物种,为混合药材的鉴定提供依据。