【应用】通过 SFC（超临界流体色谱）分离纯化甜叶菊提取物中甜菊苷的方法

步琦 2023-03-24 | 阅读：475

分离纯化甜叶菊提取物中甜菊苷

甜菊糖苷（结构式见图1 (b)）属于甜菊醇糖苷，甜菊糖苷是甜菊属植物的甜味来源。甜菊糖的增甜能力比蔗糖的甜度高许多倍，因此是一种糖的替代品。自 2011 年以来，甜菊糖苷已被欧盟批准为食品添加剂 E960。甜叶菊本身还没有被批准作为一种食品。

本文介绍了一种使用 BUCHI Sepiatec SFC 设备从甜叶菊提取物当中分离得到甜菊糖苷的方法。分离过程所使用食品级CO₂、乙醇和水作为添加剂。

实验条件

设备	Sepiatec SFC-50
色谱柱	prep HPLC column Nucleodur Si 5um 250 x 4.0m
流动相种类	A=CO₂（100%） B=乙醇/水（95/5）
流动相条件	0-2min：95%A/5%B 2-25min：5-35%B 25-31min：35%B
样品	200mg/mL 乙醇甜叶菊提取物

以 95%A/5%B，4mL/min流速条件对色谱柱平衡 5min。通过自动进样器进样并开始运行分离程序，UV检测波长设定为 210nm，背压调节阀设定为 150bar，柱温箱温度为 40℃，得到如下分离图谱：

▲ 图1：(a)甜叶菊提取物的纯化

以及(b)对 24 号组分进行 HPLC 纯化分析

结果与讨论

图1(a)展示了甜叶菊提取物的色谱图，通过乙醇对甜叶菊进行提取得到了很多化合物，甜菊糖苷作为极性分子与色谱柱的极性固定相（Slica）发生了强烈的相互作用。因此，当流动相的整体梯度极性增加是，甜菊糖苷得以被洗脱。图1(a)表明其纯度非常高。除此之外，甜菊糖苷也是提取物中甜度最高的化合物，并且可从甜菊糖总甙中的甜菊双糖苷中分离得到。

食品性质的物质提纯一般更偏向于使用乙醇。反相色谱所使用的典型溶剂甲醇或乙腈往往与食品特性不太符合的。由于流动相整体极性的增加，所以水作为添加剂可以有效改善待测分析物的峰型。

结论

使用制备型 SFC 可以有效地将甜菊糖苷从甜叶菊提取物中分离得到。通过 SFC 以及符合食品要求的溶剂可以对食品提取物进行纯化。

长按上方二维码联系我们

或拨打联系电话：

400 - 880 - 8720

微信公众号

步琦智慧实验室

淘宝官方旗舰店

瑞士步琦

上一篇【应用】喷雾干燥技术制备利福平可吸入干粉制剂的研究

【邀请函】3月30-4月1日第十届国际生物发酵产品与技术装备展览会即将开始，步琦展位C23（4号展馆）欢迎您的莅临！