固相萃取 (SPE) 系统

联用技术领域的**发展

联用技术领域的**发展是使用固相萃取 (SPE) 系统作为液相色谱 (LC) 与 NMR 之间的接口。

循环收集和转移（BPSU-36/2）是 LC-NMR 中常用的分析技术。但是，样品是在色谱系统提供的原始洗脱液和浓度状态下进行测量的。（质子化的）洗脱液对有限进样量导致的低浓度样品的干扰是无法避免的。

在LC-SPE NMR 过程中，色谱仪完成分离，相应的峰则被一一固定在色谱柱后的固相萃取柱上。

峰选择是通过 UV 检测器或通过在线的 MS 或 MSn 谱图完成。被固定的色谱峰样品可进行 NMR 测量（洗涤、干澡 ...），NMR 波谱仪配备了一个特殊的流动探头，并通过毛细管连接到固相萃取系统。色谱峰样品借助适当的（氚代）溶剂通过毛细管直接流入 NMR 探头。

特点

色谱分离可以借用廉价的非氚代溶剂，甚至是与 NMR 波谱不兼容的添加剂

由于洗脱剂中没有D2O ，色谱分离过程中就没有 H-D 交换产生，从而能够获得正确的质量信息

转移仅需要小量（大约 300 微升）氚代溶剂。

完整样品是被固相萃取柱中的少量体积的（小于 30 微升）液体洗脱的。由于这种富集效应，检测灵敏度增加 2 至 4 倍，尤其是对于更宽的峰而言这种效果更好。

通过色谱分离后的相同样品的多次富集，样品量和浓度会进一步增加，灵敏度能够提高 10 倍或以上。

于洗脱和转移的氚代溶剂不受色谱条件的影响，可以提高谱图质量，能够在 NMR 观察到可交换质子。

对于此类型的分析，布鲁克公司现在提供一个完整的 SPE-NMR 系统。该系统包括:

布鲁克∕Spark Prospekt II 固相萃取系统。

HyStar 软件包，在自动化条件下控制整个流程。

流动 NMR 探针，其检测容量可根据样品洗脱峰的体积进行调整。

这种新系统为 LC 和 NMR 的联用打开了新局面：

对浓度要求较高的 LC-NMR 的异核实验之前仅可能在有限的案例中进行，但是现在已经成为标准实验。

HSQC 和 HMBC 等类型实验使得利用 LC-(SPE) NMR 进行完全未知物的结构鉴定成为现实，这项技术可以用于诸如植物提取物的筛选。

鉴于 LC-NMR 主要用在场强为 500 MHz 和更高的磁场，借助 SPE，LC 和 NMR 的联用在较低强度磁场的应用前景更为广阔。